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評估直接由陽性血液培養瓶操作抗生素紙錠擴散試驗

抗生素管制

壁報

評估直接由陽性血液培養瓶操作抗生素紙錠擴散試驗

Evaluation of the Performing Antibiotic Disk Diffusion Test Directly from Positive Blood Culture Bottles

前言
2022年CLSI,M100,S32提出陽性血瓶直接執行特定抗生素紙錠擴散試驗,可在較短時間內得到抗生素感受性試驗結果,提早協助醫師對病人進行相關治療之參考,避免延誤治療造成後續費用增加。本文研究的目的:評估直接由陽性血液培養瓶操作特定抗生素紙錠擴散試驗之臨床測試結果。
方法
1.本實驗使用全自動血液培養偵測儀BacT/ALERT 3D(bioMérieux),陽性血瓶於陽性訊號出現後8小時內,先做革蘭氏染色判讀為單一細菌且為革蘭氏陰性桿菌。
2.依據CLSI建議,以20號針頭直接抽取陽性血瓶內檢體約0.3-0.5cc;4滴檢體在Blood agar,均勻塗佈,置35℃、5%CO2溫箱培養16~18小時,以確認該陽性檢體只生長單一細菌。另4滴檢體在Mueller Hinton agar,均勻塗佈,將agar上蓋半開等待3~5分鐘,準備貼上抗生素紙錠。
3.本實驗室 Enterobacterales使用抗生素紙錠為: Ceftazidime、Ceftriaxone、Trimethoprim-sulfamethoxazole;Pseudomonas aeruginosa 使用抗生素紙錠為:Ceftazidime、Ciprofloxacin、Meropenem。
4.Mueller Hinton agar貼上此5種抗生素紙錠後,在15分鐘內,將培養基置於35℃溫箱培養8-10小時及16-18小時。
5.同時該陽性血瓶亦依常規處理,接種至BAP/EMB agar,35℃、5%CO2溫箱培養 4-6小時,取得單一菌落,分別以VITEK MS質譜儀(bioMérieux)與VITEK 2 Compact系統(bioMérieux),執行菌名鑑定及抗生素最低抑菌濃度(MIC)試驗。
6.VITEK MS質譜儀鑑定為Enterobacterales或 Pseudomonas aeruginosa,遵循CLSI指引,於8-10 小時及16-18小時,選擇相對應之抗生素試驗表進行結果判讀。
7.本實驗以VITEK 2 Compact系統之MIC結果為標準,分別與不同時段所獲得之抗生素紙錠擴散試驗結果進行分析比較。
結果
1.本實驗隨機收集2023年01月~ 2023年03月陽性血瓶,包括50株Enterobacterales;7株Pseudomonas aeruginosa。
2.Enterobacterales:
Ceftazidime:8-10小時判讀結果一致性為84.0%;16-18小時一致性為96.0%。Ceftriaxone:8-10小時判讀結果一致性為88.0%;16-18小時一致性為98.0%。Trimethoprim-sulfamethoxazole:CLSI無提供8-10小時判讀標準;16-18小時一致性為98.0%。
3.Pseudomonas aeruginosa:
Ceftazidime:CLSI無提供8-10小時判讀標準;16-18小時一致性為100.0%。Ciprofloxacin:8-10小時及16-18小時判讀結果一致性皆為100.0%。
Meropenem:CLSI無提供8-10小時判讀標準;16-18小時一致性為100.0%。
討論
1.Enterobacterales之治療用藥 Ceftazidime、Ceftriaxone,8-10小時敏感性的一致性為84.0%-88.0%,16-18小時一致性為96.0%-98%;Pseudomonas aeruginosa 之治療用藥Ceftazidime、Ciprofloxacin、Meropenem,16-18小時敏感性的一致性為100.0%。
2.若在人力許可下,可使用質譜儀(鑑定時效約45~60 分鐘)配合Directly Disk Diffusion,快速提供醫師菌名及特定抗生素藥敏試驗初步報告,讓醫師有效地掌握治療方法及方向,使敗血症死亡率降低。

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